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全转录组:测序数据分房产新闻析及案例实践班即将开课

新闻来源:网易  2018-03-16 20:53

3、忽视了非编码RNA的细胞定位。拿lncRNA来说,lncRNA调控分为转录水平和转录后水平,ceRNA是发生在胞浆内的转录后调控,所以,决定从ceRNA这一机制入手的时候,往往没有提前证实要研究的lncRNA是否也位于胞浆;同理,当考虑lncRNA的表观修饰作用时,我们也需要证明lncRNA位于细胞核内。

无论从何种角度研究基因调控,都是从组学角度研究人类复杂疾病的有效切入点,然后分析不同的元素与复杂疾病发生发展机制的相关性,从而对导致复杂疾病发生发展的基因表达调控机制产生深入认识。

三、生物谷:近年来大热的基因编辑CRISPR/Cas9技术在非编码RNA研究中有着怎样的应用前景?

侯睿博士:利用CRISPR/Cas9敲除miRNA和lncRNA最近已经有不少相关文章发表了。对于基因的敲除来说,一般是利用Cas9核酸内切酶特异切割目标基因组DNA双链,产生DSB(Double-Strand Breaks)损伤,从而诱发DNA损伤修复机制,在修复过程中会随机引入或删除核苷酸对,导致目标基因内核苷酸对的删除或插入,从而形成移码突变,造成目标基因的突变,实现基因敲除。而如果在编码基因的目标外显子的5’侧翼和3’侧翼分别设计一个sgRNA,则可以实现片段式的基因敲除。miRNA的敲除类似于后者,CRISPR/Cas9能够精确找到microRNA前体的5’侧翼和3’侧翼序列,实现microRNA前体序列相对应的基因组区段的彻底敲除。而对于lncRNA来说,任何敲除或干扰都具有更高的挑战性。一方面,对于转录lncRNA的基因来说,小的插入缺失很可能并不会影响转录产物的功能。另一方面, lncRNA跟mRNA在基因组的相对位置上很靠近,这时候敲除lncRNA的同时可能会影响附近基因的表达,或者是附近其它功能元件,比如增强子。而在很多情况下, lncRNA和mRNA两者的序列具有高度的重叠,敲除lncRNA的同时可能就把同一区段的mRNA也敲除掉了。

二、生物谷:目前国内外对于非编码RNA的研究还有哪些不足之处?

侯睿博士:非编码RNA研究还处在非常早期的阶段,研究方法的局限和人们认识的片面性是很正常的,要说不足之处我个人主要有三点看法:

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